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中国人民解放军总医院老年心血管病研究所
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创刊人 王士雯
总编辑 范利
副总编辑 陈韵岱
执行主编 叶大训
编辑部主任 王雪萍
ISSN 1671-5403
CN 11-4786
创刊时间 2002年
出版周期 月刊
邮发代号 82-408
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佘丹阳,刘又宁.多药耐药阴沟肠杆菌临床株ampC基因的克隆和表达[J].中华老年多器官疾病杂志,2007,6(5):329~333
多药耐药阴沟肠杆菌临床株ampC基因的克隆和表达
Cloning and expression of ampC gene from a multidrug resistant isolate of Enterobacter cloacae
  
DOI:
中文关键词:  肠杆菌,阴沟;β-内酰胺酶类;克隆;基因
英文关键词:
基金项目:
佘丹阳,刘又宁
解放军总医院呼吸科,解放军总医院呼吸科
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中文摘要:
      目的克隆一株临床分离的多药耐药阴沟肠杆菌的ampC基因,并研究其编码的AmpCβ-内酰胺酶的特性。方法聚合酶链反应(PCR)扩增阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因,将扩增的目标片段连接入pMD18-T进行双链测序后,进一步克隆入pACYC184质粒,用获得的pACYC184/ampC重组质粒转化大肠杆菌MC4100。采用琼脂稀释法测定阴沟肠杆菌ECLC074,大肠杆菌MC4100及大肠杆菌MC4100重组菌的抗生素敏感性,采用三维试验及等电聚焦电泳研究β-内酰胺酶的特性。结果DNA测序及限制性酶切分析结果表明,阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因已被克隆入pACYC184质粒,大肠杆菌MC4100重组菌和阴沟肠杆菌ECLC074均产生一种等电点为7.8的β-内酰胺酶,该酶具有AmpCβ-内酰胺酶的耐药表型特征。结论阴沟肠杆菌的ampC基因可以被克隆入pACYC184质粒,并能在大肠杆菌MC4100中表达,这为深入研究染色体AmpCβ-内酰胺酶创造了条件。
英文摘要:
      
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